【名稱】蘄蛇
【英文名】AGKISTRODON
【別名】大白花蛇、棋盤蛇、五步蛇、百步蛇
【來源】本品為蝰科動(dòng)物五步蛇Agkistrodon acutus (Guenther)的干燥體。多于夏、秋二季捕捉,剖開蛇腹,除去內(nèi)臟,洗凈,用竹片撐開腹部,盤成圓盤狀,干燥后拆除竹片。
【性狀】本品卷呈圓盤狀,盤徑17~34cm,體長可達(dá)2m。頭在中間稍向上,呈三角形而扁平,吻端向上,習(xí)稱“翹鼻頭”。上腭有管狀毒牙,中空尖銳。背部兩側(cè)各有黑褐色與淺棕色組成的“V”形斑紋17~25個(gè),其“V”形的兩上端在背中線上相接,習(xí)稱“方勝紋”,有的左右不相接,呈交錯(cuò)排列。腹部撐開或不撐開,灰白色,鱗片較大,有黑色類圓形的斑點(diǎn),習(xí)稱“連珠斑”;腹內(nèi)壁黃白色,脊椎骨的棘突較高,呈刀片狀上突,前后椎體下突基本同形,多為彎刀狀,向后傾斜,尖端明顯超過椎體后隆面。尾部驟細(xì),末端有三角形深灰色的角質(zhì)鱗片1枚。氣腥,味微咸。\r\n本品呈段狀,長2~4cm,背部呈黑褐色,表皮光滑,有明顯的鱗斑,可見不完整的方勝紋。腹部可見白色的肋骨,呈黃白色、淡黃色或黃色。斷面中間可見白色菱形的脊椎骨,脊椎骨的棘突較高,棘突兩側(cè)可見淡黃色的肉塊,棘突呈刀片狀上突,前后椎體下突基本同形,多為彎刀狀。肉質(zhì)松散,輕捏易碎。氣腥,味微咸。\r\n本品呈條狀或塊狀,長2~5cm,可見深黃色的肉條及黑褐色的皮。肉條質(zhì)地較硬,皮塊質(zhì)地較脆。有酒香氣,味微咸。\r\n本品形如蘄蛇段,表面棕褐色或黑色,略有酒氣。氣腥,味微咸。
【鑒別】聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法。模板DNA提取 取本品0.5g,置乳缽中,加液氮適量,充分研磨使成粉末,取0.1g,置1.5ml離心管中,加入消化液275μl[細(xì)胞核裂解液200μl,0.5mol/L乙二胺四醋酸二鈉溶液50μl,蛋白酶K(20mg/ml)20μl,RNA酶溶液5μl],在55℃水浴保溫1小時(shí),加入裂解緩沖液250μl,混勻,加到DNA純化柱中,離心(轉(zhuǎn)速為每分鐘10000轉(zhuǎn))3分鐘;棄去過濾液,加入洗脫液800μl [5mol/L醋酸鉀溶液26μl,1mol/LTris-鹽酸溶液(pH7.5)18μl,0.5mol/L乙二胺四醋酸二鈉溶液(pH8.0)3μl,無水乙醇480μl,滅菌雙蒸水273μl],離心(轉(zhuǎn)速為每分鐘10000轉(zhuǎn))1分鐘;棄去過濾液,用上述洗脫液反復(fù)洗脫3次,每次離心(轉(zhuǎn)速為每分鐘10000轉(zhuǎn))1分鐘;棄去過濾液,再離心2分鐘,將DNA純化柱轉(zhuǎn)移入另一離心管中,加入無菌雙蒸水100μl,室溫放置2分鐘后,離心(轉(zhuǎn)速為每分鐘10000轉(zhuǎn))2分鐘,取上清液,作為供試品溶液,置-20℃保存?zhèn)溆?。另取蘄蛇對(duì)照藥材0.5g,同法制成對(duì)照藥材模板DNA溶液。PCR反應(yīng)鑒別引物:5' GGCAATTCACTACACAGCCAACATCAACT 3'和5' CCATAGTCAGGTGGTTAGTGATAC3' 。PCR反應(yīng)體系:在200μl離心管中進(jìn)行,反應(yīng)總體積為25μl,反應(yīng)體系包括10×PCR緩沖液2.5μl,dNTP(2.5mmol/L)2μl,鑒別引物(10μmol/L)各0.5μl,高保真TaqDNA聚合酶(5U/μl)0.2μl,模板0.5μl,無菌雙蒸水18.8μl。將離心管置PCR儀,PCR反應(yīng)參數(shù):95℃預(yù)變性5分鐘,循環(huán)反應(yīng)30次(95℃30秒,63℃45秒),延伸(72℃)5分鐘。電泳檢測 照瓊脂糖凝膠電泳法方法2(通則0541),膠濃度為1%,膠中加入核酸凝膠染色劑GelRed;供試品與對(duì)照藥材PCR反應(yīng)溶液的上樣量分別為8μl,DNA分子量標(biāo)記上樣量為2μl(0.5μg/μl)。電泳結(jié)束后,取凝膠片在凝膠成像儀上或紫外透射儀上檢視。供試品凝膠電泳圖譜中,在與對(duì)照藥材凝膠電泳圖譜相應(yīng)的位置上,在300~400bp應(yīng)有單一DNA條帶。\r\n同蘄蛇(飲片)。\r\n同蘄蛇(飲片)。
【炮制】蘄蛇 去頭、鱗,切成寸段。
【性味】甘、咸,溫;有毒。歸肝經(jīng)。
【歸經(jīng)】歸肝經(jīng)。
【功效】祛風(fēng),通絡(luò),止痙。用于風(fēng)濕頑痹,麻木拘攣,中風(fēng)口眼?斜,半身不遂,抽搐痙攣,破傷風(fēng),麻風(fēng),疥癬。
【用法用量】3~9g;研末吞服,一次1~1.5g,一日2~3次。
【儲(chǔ)藏】置干燥處,防霉,防蛀。
【摘錄出處】《中國藥典》